ਟੈਸਟੋਸਟੀਰੋਨ ਬਾਇਓਸਿੰਥੇਸਿਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਿਚਕਾਰਲਾ, ਟੈਸਟਿਸ ਜਾਂ ਐਡਰੀਨਲ ਗ੍ਰੰਥੀਆਂ ਵਿੱਚ ਪਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਐਂਡਰੋਸਟੇਨੇਡੀਓਲ, 17-ਕੇਟੋ ਗਰੁੱਪ (17-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸੀਸਟੀਰੋਇਡ ਡੀਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨੇਸ) ਦੀ ਕਮੀ ਦੁਆਰਾ ਡੀਹਾਈਡ੍ਰੋਪੀਐਂਡਰੋਸਟੇਰੋਨ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, 3-ਬੀਟਾ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਲ ਗਰੁੱਪ ਦੇ ਆਕਸੀਕਰਨ ਦੁਆਰਾ ਟੈਸਟੋਸਟੀਰੋਨ ਵਿੱਚ ਬਦਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।